Архив выпусков2018Том 58, № 5стр. 484-489

Статья

Проблема анализа пострадиационных изменений количества фокусов γН2AX в асинхронной клеточной популяции

Грехова А.К.1,2,3, Пустовалова М.В.2,3, Еремин П.С. 4, Яшкина Е.И.2, Осипов А.Н.2,3

1 Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН, Москва, Россия 2Федеральный медицинский биофизический центр им. А.И. Бурназяна ФМБА России, Москва, Россия 3 Институт химической физики им. Н.Н. Семенова РАН, Москва, Россия 4 Национальный медицинский исследовательский центр реабилитации и курортологии Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, Россия

Аннотация

Количественный анализ фокусов фосфорилированного гистона Н2AX (γH2AX) в настоящее время используется для изучения закономерностей индукции и репарации радиационно-индуцированных двунитевых разрывов ДНК. При этом нередко исследования проводятся на асинхронной клеточной популяции без учета того факта, что ионизирующее излучение влияет на пролиферативную активность клеток и их распределение по фазам клеточного цикла. В ходе настоящей работы был произведен дифференцированный анализ изменений количества фокусов γН2AX в течение 24 ч после воздействия рентгеновского излучения в дозах 80, 250 и 1000 мГр в асинхронных, покоящихся (Ki67–), пролиферирующих (Ki67+) и находящихся в S/G2-фазах (CENPF+) популяциях фибро-бластов кожи человека. Показано, что абсолютное количество фокусов γН2AX как в контрольных, так и в облученных клетках существенно зависит от пролиферативной активности и является максимальным для клеток в S/G2-фазе. Рентгеновское излучение в малой (80 мГр) и средних (250 и 1000 мГр) дозах по-разному влияют на пролиферативную активность клеток (стимулируя и ингибируя соответственно), что приводит к некорректному анализу результатов при подсчете фокусов γH2AX в асинхронной клеточной популяции.

Ключевые слова

двунитевые разрывы ДНК, фокусы γH2AX, пролиферация, KI-67, CENP-F, фибробласты, рентгеновское излучение